• лабораторія-217043_1280

Метод видалення залишків клітин

Після механічного лізису клітинної суспензії залишається багато клітинних фрагментів.Як видалити ці фрагменти?Давайте розглянемо різні підходи:

1. Використовуйте метод розведення.Коли клітини розбавляються, вони також можуть проліферувати, їх буде ставати все більше і більше, і клітинного сміття, відповідно, буде ставати все менше і менше.
2. Існує також природне осідання.Клітини осідають швидше, ніж більшість фрагментів: : Перемістіть клітинну суспензію вцентрифужна трубка, і коли більша частина клітин опускається, верхній розчин можна відсмоктати, а потім додати до культурального розчину для суспендування клітин.Цей метод можна використовувати неодноразово, при цьому щоразу ви можете спостерігати, чи відповідає він вашим вимогам під мікроскопом.
3. Низькооборотна центрифугаможе видалити сміття, зазвичай 700 г, 5 хв
4. При центрифугуванні, за умови, що кількість клітин достатня, зменшіть час центрифугування, наприклад 5 хв, 1000 об/хв, замість 3 хв, 1000 об/хв, і видаліть супернатант, оскільки некроз і залишки, як правило, знаходяться в супернатанті!Цю операцію потрібно виконати лише один раз під час процесу промивання перед інкубацією!

Хоча існує багато способів видалення залишків клітин, ви побачите, що центрифугування є одним із найефективніших методів!

450

А оскільки тканини та клітини рослин мають клітинні стінки, що складаються з целюлози, геміцелюлози та пектину, для досягнення мети, як правило, необхідно подрібнити кварцовий пісок або скляний порошок з відповідним екстракційним розчином або обробити целюлазою.Фрагментація бактеріальної клітини більш складна, тому що весь скелет бактеріальної клітинної стінки насправді є ковалентним зв’язком кістозних макромолекул пептидоглікану, дуже міцних.Загальні методи руйнування клітинних стінок бактерій включають ультразвукове дроблення, подрібнення піску, екструзію під високим тиском або обробку лізоцимом.Після того, як тканина і клітини розбиті, вибирається відповідний буфер для екстракції потрібного білка.Нерозчинні матеріали, такі як фрагменти клітин, видаляютьсяцентрифугаабо фільтрація.

будь ласка, зв'яжіться з Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Час публікації: 24 липня 2023 р