Коли клітини ми культивуємо

клітинний заводзабруднені, більшість із них важко обробляти.Якщо забруднені клітини є цінними і їх важко знову отримати, для їх видалення можна використати наступні методи.

1. Використовуйте антибіотики

Антибіотики більш ефективно знищують бактеріїклітинні фабрики.Комбінований препарат більш ефективний, ніж монотерапія.Профілактичне лікування ефективніше, ніж лікування після зараження.Для профілактики зазвичай використовується подвійний антибіотик (пеніцилін 100 од/мл плюс стрептоміцин 100 мкг/мл).Після забруднення метод очищення повинен бути в 5-10 разів більшим, ніж звичайна кількість.Препарат слід використовувати протягом 24-48 годин після додавання, а потім замінити на звичайний режим.Культуральна рідина.Цей метод може бути ефективним на ранніх стадіях зараження.Окрім пеніциліну та стрептоміцину, використовувані антибіотики також можуть включати гентаміцин, канаміцин, поліміксин, тетрациклін, ністатин тощо. Зазвичай використовуються від 400 до 800 мкг/мл канаміцину або 200 мкг/мл тетрацикліну.Середовище змінюють кожні 2-3 дні і передають 1-2 поколінням для лікування.Останніми роками повідомлялося, що 4-фтор, 2-гідроксихінолін (ципрофлоксацин, Cip), похідне плевромутиліну (похідне плевромутиліну, BM-Cyclin2: BM-1 і похідне тетрацикліну (BM-2)) є антибіотиками. ефективний у знищенні мікоплазми при застосуванні окремо або в комбінації.Ці три антибіотики готують у 250X концентрованих розчинах у PBS і зберігають при -20°C для подальшого використання.Використовувана концентрація Cip становить 10 мкг/мл, BM-1 — 10 мкг/мл, а BM-2 — 5 мкг/мл.Під час використання спочатку аспіруйте забруднене культуральне середовище, додайте культуральне середовище RPMI1640, що містить BM-1, потім аспіруйте культуральне середовище через 3 дні, додайте культуральне середовище RPMI1640, що містить BM-2, і культивуйте протягом 4 днів, і так далі протягом 3 днів поспіль .раундів, доки за допомогою мікроскопії з флуоресцентним фарбуванням 33258 не буде доведено, що мікоплазма була елімінована, потім додається звичайне культуральне середовище для культивування та пасування 3-4 рази.

2. Теплова обробка

Інкубація зараженої тканинної культури при 41°C протягом 18 годин може вбити мікоплазму, але має негативний вплив на клітини.Тому перед лікуванням слід провести попередній тест, щоб визначити час нагрівання, який може максимально знищити мікоплазму та мати найменший вплив на клітини.Цей спосіб іноді ненадійний.Якщо спочатку обробити препаратами, а потім нагріти до 41°C, ефект буде кращим.

3. Використовуйте мікоплазмоспецифічну сироватку

Зараження мікоплазмою можна видалити за допомогою 5% імунної сироватки проти мікоплазми кролика (титр гемаглютинації 1:320 або вище).Оскільки специфічне антитіло може пригнічувати ріст мікоплазми, воно стає негативним через 11 днів після обробки антисироваткою і залишається негативним через 5 місяців.є негативним.Однак цей спосіб більш клопіткий і не такий зручний і економічний, як використання антибіотиків.

4. Інші методи

Крім перерахованих методів видалення контамінації, існують також методи інокуляції та стерилізації тварин, методи фагоцитозу макрофагів, методи додавання бромурацилу до контамінованих.культурні пляшкиа потім опромінення їх світлом, методи фільтрації тощо, але всі вони більш складні та неефективні.Тому, як тільки відбувається зараження мікоплазмою, якщо вона не має особливо важливого значення, її зазвичай викидають і повторно культивують.

будь ласка, зв'яжіться з Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709